završni rad
Određivanje potencijalnog bioremedijacijskog učinka enzima lakaze putem umu-testa

Lara Juršić (2016)
Sveučilište Jurja Dobrile u Puli
Odjel za prirodne i zdravstvene studije
Podaci o radu
NaslovOdređivanje potencijalnog bioremedijacijskog učinka enzima lakaze putem umu-testa
AutorLara Juršić
Voditelj/MentorBojan Hamer (mentor)
Sažetak rada
Uslijed porasta znanstvenog i javnog interesa učinaka genotoksina u okolišu pojavila se potreba za bioremedijacijom zagađivala te ispitivanjem različitih bioaktivnih spojeva i procesa u tu svrhu. Bioremedijacija je proces u kojem se koristi metabolitički potencijal mikroorganizama kao što su bakterije i gljive kako bi se pročistila zagađena područja i materijal. Metaloenzim lakaza je čest i široko rasprostranjen enzim koji pripada skupini oksidoreduktaza, a primarna funkcija joj je razgradnja lignina u gljivama. Lakaza nema svojstvo specifičnosti prema točno određenom supstratu, kao ni svojstvo stereospecifičnosti. Bioremedijacijski učinak enzima lakaze testiran je inkubacijom lakaze s različitim razrjeđenjima modelnih spojeva određivanjem genotoksične aktivnosti putem umu-testa. Genotoksični potencijal, odnosno aktivnost uzorka određena je mjerenjem aktivnosti β-galaktozidaze i izračunavanjem indukcijskih omjera (IF), a bioremidijacijski učinak je promatran usporedbom genotoksične aktivnosti koncentracija modelnih spojeva sa i bez enzima lakaze. Na temelju rezultata lakazom smanjene genotoksične aktivnosti modelnih spojeva 4-NQO i 2-AA te smjese ugljikovodika sadržanih u vodotopivoj frakciji nafte (VFN) proizlazi zaključak da odabrana koncentracija lakaze (1,00 U/ml) ima potencijalnu bioremedijacijsku vrijednost te ne posjeduje metaboličku aktivnost koja bi se mogla iskoristiti za metaboličku aktivaciju indirektnih genotoksina umjesto S9 frakcije jetre. Ovo je preliminarno testiranje te su nužna danja istraživanja i optimizacija uvjeta, što samog enzima, što postupka određivanja aktivnosti putem umu-testa.
Ključne riječiumu-test genotoksičnost vodotopiva frakcija nafte bioremedijacija lakaza
Naslov na drugom jeziku (engleski)Potential bioremediation effect determination of enzyme laccase using the umu-test
Povjerenstvo za obranuDijana Pavičić-Hamer (predsjednik povjerenstva)
Bojan Hamer (član povjerenstva)
Ines Kovačić (član povjerenstva)
Ustanova koja je dodijelila akademski/stručni stupanjSveučilište Jurja Dobrile u Puli
Ustrojstvena jedinica niže razineOdjel za prirodne i zdravstvene studije
MjestoPula
Država obraneHrvatska
Znanstveno područje, polje, granaPRIRODNE ZNANOSTI
Interdisciplinarne prirodne znanosti
Znanost o moru
Vrsta studijasveučilišni
Stupanjpreddiplomski
Naziv studijskog programaZnanost o moru
Akademski / stručni nazivsveučilišni/a prvostupnik/prvostupnica (baccalaureus/baccalaurea) znanosti o moru
Kratica akademskog / stručnog nazivauniv. bacc. mariscient
Vrsta radazavršni rad
Jezik hrvatski
Datum obrane2016-09-14
Sažetak rada na drugom jeziku (engleski)
Due to increased scientific and general public interest of genotoxin effects in the environment, bioremediation of the toxicants and further investigation of a vast spectrum of bioactive compounds is needed. Bioremediation is a process in which metabolic potential of microorganisms, such as bacteria and fungi, is used to cleanse contaminated areas and materials. Metalloenzyme laccase is a frequent and widespread enzyme of the oxidoreductase group and his primary function is degradation of lignin in fungi. Laccase is not specific to a substrate nor is it stereospecific. Bioremediation effect of the lactase enzyme was tested by incubation of lactase with different dilutions of model compounds and determination of genotoxic activity by umu-test. Genotoxic potential, in other words, genotoxic activity, was determined by measuring β-galactosidase activity and calculating induction ratio (IR), while the bioremediation effect was observed through comparison of genotoxic activity of model compounds concentrations with and without laccase. Based on the results of diminished genotoxic activity of model compounds 4-NQO, 2-AA and the mixture of hydrocarbons present in the water soluble fraction of crude oils (WSF). From presented data it is possible to conclude that laccase concentration of 1 U/ml has a potentially bioremediative value and does not possess metabolic activity which could be used for metabolic activation of indirect genotoxins instead of the S9 liver fraction. This is a preliminary experiment and further examinations and optimization of conditions are needed regarding both the enzyme and determination of activity by umu-test.
Ključne riječi na drugom jeziku (engleski)umu-test genotoxicity watersolubile fraction of crude oil bioremediation laccase
Vrsta resursatekst
Prava pristupaRad u otvorenom pristupu
Uvjeti korištenja radahttp://rightsstatements.org/vocab/InC/1.0/
URN:NBNhttps://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:137:579927
PohranioRuža Šutalo